脊柱外科

腰椎間盤突出癥最微創(chuàng)的手術(shù)方法--椎間孔鏡手術(shù)“椎間孔鏡技術(shù)”的出現(xiàn)，將椎間盤突出癥的微創(chuàng)治療推向全新的高度，是目前最微創(chuàng)、最經(jīng)濟的手術(shù)。醫(yī)生通過皮膚穿刺將椎間孔鏡導入到患者腰椎內(nèi)，摘除突出的髓核，達到神經(jīng)減壓的目的。椎間孔鏡手術(shù)是以最小的代價獲取最大的收益。手握的器械就是椎間孔鏡椎間孔鏡技術(shù)的優(yōu)勢1.超微創(chuàng)：皮膚切口僅為7mm左右，皮內(nèi)縫合，不用拆線，術(shù)后幾乎不留疤痕。不破壞椎旁肌肉和韌帶，不咬除椎板，出血極少，避免傳統(tǒng)開放手術(shù)對椎管和神經(jīng)的干擾，對脊柱穩(wěn)定性無影響。椎間孔鏡手術(shù)被譽為當前世界上治療腰椎間盤突出癥“最微創(chuàng)、最溫和的手術(shù)”。2.另外一個很重要的方面是這個手術(shù)可以在局麻下進行，避免了全麻，減少了對全身器官的干擾。3.安全性高：在椎間孔鏡下放大幾十倍，可以清楚地看到突出的椎間盤和神經(jīng)，手術(shù)視野極其清晰。用局麻手術(shù)時，術(shù)中能與病人互動，獲得患者的直接反饋以避免損傷神經(jīng)根。4.療效好：在直視下獲得神經(jīng)根的充分減壓，術(shù)后立即緩解疼痛等癥狀。5.康復快：術(shù)后即可下地活動，，大小便可以自理，護理簡單。國際化的理念指導康復，術(shù)后早日恢復正常生活和工作。6.適應(yīng)癥廣：可摘除大多數(shù)類型椎間盤突出及脫出，能處理椎間孔狹窄及部分椎管狹窄。典型病例：男，43歲，腰腿痛10余年，加重2月。磁共振和CT：L5/S1 椎間盤脫出：椎間孔鏡取出大塊突出的椎間盤：手術(shù)徹底減壓神經(jīng)（神經(jīng)被放大幾十倍，非常清楚）：手術(shù)傷口極?。ê鸵辉矌艑Ρ龋也挥貌鹁€： 手術(shù)后2小時就可以下床，患者非常滿意

（1常熟市第二人民醫(yī)院，江蘇 常熟 215500 ）摘 要 目的：對比肌間隙入路與傳統(tǒng)后正中入路椎弓根螺釘固定結(jié)合術(shù)后康復鍛煉治療胸腰椎骨折的臨床療效。方法：2009年8月～2012年7月收治的無神經(jīng)癥狀、無需椎管減壓的胸腰椎骨折患者190例，隨機分為兩組：肌間隙入路組及傳統(tǒng)后正中入路組，行椎弓根螺釘內(nèi)固定并結(jié)合術(shù)后康復鍛煉治療，分析手術(shù)時間、出血量、術(shù)后耐受腰背肌鍛煉時間、術(shù)后下地時間、術(shù)前、術(shù)后1周及術(shù)后1月疼痛視覺模擬量表評分、術(shù)后半年及一年隨訪腰背痛JOA評分和術(shù)前術(shù)后及末次Cobb角的變化。結(jié)果：椎旁肌間隙入路在手術(shù)時間、出血量、術(shù)后耐受腰背肌鍛煉時間、術(shù)后下地時間、術(shù)前、術(shù)后1周及術(shù)后1月疼痛視覺模擬量表評分、術(shù)后半年腰背痛JOA評分上均明顯優(yōu)于常規(guī)入路（P<0.05），兩組術(shù)后及術(shù)前Cobb角變化有統(tǒng)計學意義（P<0.05），但組間對比無統(tǒng)計學意義。術(shù)后一年隨訪腰背痛JOA評分無統(tǒng)計學意義。結(jié)論：經(jīng)多裂肌和最長肌間隙入路椎弓根螺釘固定治療無神經(jīng)癥狀型胸腰椎骨折，能早期康復鍛煉，具有創(chuàng)傷小，恢復快，耐受好，腰背痛發(fā)生少等優(yōu)點，是一種實用的治療方法。關(guān)鍵詞 脊柱骨折后入路 康復鍛煉Treatment of Pedicle Screw Fixtion for the Thoracolumbar Fracture with theImpact of different lumbar posterior approaches combine rehabilitation exerciseWU Jian,Changshu NO 2 People’s Hospital, Changshu 215500, Jiangsu, China.【Abstract】Objective To evaluate the clinical outcomes of thoracolumbar fractures treatment through Pedicle Screw Fixtion with Intrasacrospinal Muscular Approach combine rehabilitation exercise and compare this method with the conventional approach. Methods From August 2009 to July 2012, a total of 190 cases of non-neurological symptoms patients with thoracic and lumbar spine fractures were included in the study. The patients were divided into two groups: Intrasacrospinal Muscular Approach group and conventional approach group. We analyzed operative time, blood loss,Startthe exercise timeafter operation, duration of recumbence, preoperative and postoperative VAS score and Cobb angle,the low back pain JOA score after six months and one year. Results Intrasacrospinal Muscular Approach group in operative time, blood loss,Startthe exercise timeafter operation, duration of recumbence, postoperative VAS score and the low back pain JOA score after six months were significantly better than the conventional approach type. postoperative Cobb angle were better than Preoperative, deference have statistics significance（P<0.05）, The comparison between the two groups were not statistically significant. the low back pain JOA score after one year were not statistically significant. Conclusin Treatment of Pedicle Screw Fixtion for the Thoracolumbar Fracture with Intrasacrospinal Muscular Approach combine the low back exercise is a Practical comprehensive method.Key words spine fracture; Posterior approach; rehabilitation exercise無神經(jīng)癥狀型胸腰椎骨折是脊柱外科常見病多發(fā)病，隨著交通及建筑業(yè)的發(fā)展，胸腰椎骨折發(fā)生率逐年增加，嚴重影響了國民的健康。傳統(tǒng)的后正中入路手術(shù)方式采用大范圍剝離椎旁肌，造成椎旁肌缺血壞死及失神經(jīng)支配[1]，術(shù)后短期內(nèi)疼痛較重，無法早期康復鍛煉，遠期產(chǎn)生腰背痛等并發(fā)癥較多，經(jīng)多裂肌和最長肌間隙入路的發(fā)現(xiàn)為我們脊柱外科帶來了新的契機，我科從2009年8月～2012年7月采用兩種入路方法結(jié)合術(shù)后早期康復鍛煉治療無神經(jīng)癥狀型胸腰椎骨折190例，對比兩種方法的優(yōu)劣，現(xiàn)報道如下。1.
臨床資料1.1 一般資料：2009年8月～2012年7月收治的無神經(jīng)癥狀、無需椎管減壓的胸腰椎骨折患者190例，隨機分為2組：肌間隙入路組及傳統(tǒng)后正中入路組，肌間隙入路組95例，男46例，女49例；年齡21～70歲，平均49.1歲。受傷原因：高處墜落傷44例，交通事故傷23例，重物壓傷3例，摔倒受傷25例。骨折部位：胸11骨折1例，胸12骨折30例，腰1骨折47例，腰2骨折17例。傳統(tǒng)后正中入路組95例，男48人，女47人；年齡24～69歲，平均50.7歲。受傷原因：高處墜落傷47例，交通事故傷26例，重物壓傷3例，摔倒受傷19例。骨折部位：胸11骨折3例，胸12骨折34例，腰1骨折40例，腰2骨折18例。人選條件：(1)外傷前無胸腰椎疾病史；(2)術(shù)前行損傷脊椎正側(cè)位、CT和MRI檢查，骨折為單節(jié)段骨折，Denis骨折分類為單純壓縮性或爆裂性骨折，X線示椎體壓縮大于1／3，后凸Cobb角大于150°。CT顯示椎體后緣骨塊突入椎管小于1／3(椎管容積)，MRI顯示后方韌帶無損傷；(3)ASIA分級為E級，不需進行椎管減壓術(shù)[2]。1.2 手術(shù)方法：傳統(tǒng)后正中入路剝離脊旁肌暴露椎板及雙側(cè)關(guān)節(jié)突關(guān)節(jié)，置入椎弓根釘，行骨折固定復位。肌間隙入路取后正中切口，自腰背筋膜表面潛行分離皮下組織至正中旁開約2.0 cm，尋找多裂肌與最長肌間隙，一般在胸12～腰2節(jié)段正中旁開1.5～2.0 cm即為肌間隙，切開胸腰筋膜，鈍性分離肌間隙直達關(guān)節(jié)突和橫突，用電凝剝離小關(guān)節(jié)突的外側(cè)部分，采用人字嵴或橫突定位方法進行椎弓根螺釘置入。術(shù)畢縫合肌間隙表面筋膜，肌肉自然對合，封閉死腔[3]。1.3 術(shù)后康復：術(shù)后在疼痛耐受情況下指導患者在非負重狀態(tài)下進行腰背肌鍛煉。術(shù)后2周內(nèi)采用仰臥位背伸肌鍛煉，即五點支撐法和三點支撐法，五點支撐法以頭部、雙肘及雙足跟作為支撐點，仰臥在床上，去枕屈膝，雙肘部及背部頂住床，腹部及臀部向上抬起，撐起整個身體的重量，持續(xù)3～5 秒，然后腰部肌肉放松，放下臀部休息3～5 秒即為一個周期，以加強腰背肌的力量。待腰背肌力量加強后改用頭部及雙足跟為支撐點的三點支撐法。手術(shù)2周后加強腰背肌強度鍛煉，采取俯臥位背伸肌鍛煉法：飛燕點水法，鍛煉時囑患者俯臥在硬板床上，去枕，雙手背后，用力挺胸抬頭，使頭胸離開床面，同時膝關(guān)節(jié)伸直，兩大腿用力向后離開床面，持續(xù)3～5秒，然后肌肉放松休息3～5秒即為一個周期，腰背肌鍛煉幅度由小到大，早晚各鍛煉一次，每次20～30個周期，以松解腰背肌、臀肌的痙攣，增加腰背肌的抗力[4]。在腰背肌鍛煉的同時，鼓勵患者佩戴腰圍早期下地行走。1.4 觀察指標：記錄兩組患者的手術(shù)時間、出血量、術(shù)后耐受腰背肌鍛煉時間、術(shù)后下地時間、術(shù)前、術(shù)后1周及術(shù)后1月疼痛視覺模擬量表評分、術(shù)后半年及一年隨訪腰背痛JOA評分，術(shù)后定期隨訪行脊柱正側(cè)位檢查，測量術(shù)前、術(shù)后及末次隨訪時Cobb角的變化，觀察內(nèi)固定有無松動、斷釘、斷棒及復位丟失等并發(fā)癥。1.5 統(tǒng)計學處理：用SPSS l3.0統(tǒng)計軟件對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，手術(shù)時間、出血量、術(shù)后耐受腰背肌鍛煉時間、術(shù)后下地時間、術(shù)前、術(shù)后1周及術(shù)后1月疼痛視覺模擬量表評分、術(shù)后半年及一年隨訪腰背痛JOA評分、術(shù)前、術(shù)后及末次隨訪時Cobb角的變化采用成組t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。2 結(jié)果兩組患者性別、年齡、受傷節(jié)段及隨訪時間等方面比較，差異無統(tǒng)計學意義。肌間隙入路組與傳統(tǒng)后正中入路組在術(shù)前、術(shù)后及末次隨訪時Cobb角的變化無明顯統(tǒng)計學意義（表1），但肌間隙入路組在手術(shù)時間、出血量、術(shù)后耐受腰背肌鍛煉時間、術(shù)后下地時間、術(shù)后1周及術(shù)后1月疼痛視覺模擬量表評分、術(shù)后半年隨訪腰背痛JOA評分等方面具有明顯優(yōu)勢，差異有統(tǒng)計學意義（表2、3、4），兩組患者術(shù)后一年隨訪腰背痛JOA評分無明顯差異（表4）。所有患者術(shù)后均獲得隨訪，未出現(xiàn)椎體高度丟失、再骨折、螺釘松動、斷棒、斷釘?shù)炔l(fā)癥。表1 兩組患者在術(shù)前、術(shù)后及末次隨訪Cobb角的比較指標后正中入路多裂肌入路P值術(shù)前Cobb角29.6±6.630.2±4.3>0.05術(shù)后Cobb角5.9±2.16.1±1.9>0.05末次隨訪Cobb角6.7±3.06.5±2.8>0.05表2 兩組患者在手術(shù)時間、術(shù)中出血量、腰背肌鍛煉時間及術(shù)后下地時間等方面的比較指標后正中入路多裂肌入路P值手術(shù)時間（min）71.5±9.260.9±5.8<0.05術(shù)中出血量（ml）213.5±34.9102.1±25.9<0.05腰背肌鍛煉時間（d）5.9±2.43.4±1.6<0.05術(shù)后下地時間（d）10.2±2.06.7±1.4<0.05表3 兩組患者在術(shù)前、術(shù)后一周及術(shù)后一月VAS評分指標后正中入路多裂肌入路P值術(shù)前VAS評分5.6±1.65.8±1.2>0.05術(shù)后一周VAS評分4.2±2.73.1±2.1<0.05術(shù)后一月VAS評分2.3±1.41.4±0.9<0.05表4 兩組患者在術(shù)后半年及術(shù)后一年腰背痛JOA評分指標后正中入路多裂肌入路P值術(shù)后半年腰背痛JOA評分22.7±2.324.8±1.2<0.05術(shù)后一年腰背痛JOA評分25.9±2.126.1±1.8>0.053 討論胸腰段是活動的腰椎和固定的胸椎的轉(zhuǎn)換點，軀干應(yīng)力集中于此，是胸椎生理后凸與腰椎生理前凸的銜接點，肩背應(yīng)力亦集中于此，關(guān)節(jié)突的關(guān)節(jié)面朝向在胸腰段移行[5]，故胸腰段骨折多見。傳統(tǒng)的胸腰椎后正中入路手術(shù)廣泛剝離椎旁肌，會損傷腰神經(jīng)后內(nèi)側(cè)支，術(shù)中長時間牽拉椎旁肌，術(shù)后瘢痕形成等，導致椎旁肌的失神經(jīng)支配和肌肉纖維化。同時腰動脈背側(cè)支(主要是分布于豎脊肌的降肌支)術(shù)中因長時間牽拉，電凝止血等而受到損傷，椎旁肌缺血，代謝紊亂，從而造成壞死萎縮，導致術(shù)后腰背不適。椎旁肌的神經(jīng)源性改變和肌源性改變易形成腰骶椎術(shù)后未緩解或復發(fā)的慢性疼痛（failed back surgery syndrome，F(xiàn)BSS），是胸腰椎手術(shù)后一種常見并發(fā)癥。美國FBSS在胸腰椎手術(shù)患者中的發(fā)病率為5％-40％，平均15％[6-7]。因此，為了減少術(shù)后FBSS的發(fā)生，W iltse等學者提出了經(jīng)多裂肌和最長肌間隙入路[8]。經(jīng)多裂肌和最長肌間隙入路的優(yōu)點：①所有顯露過程都是在肌間隙完成。保留了椎旁肌肉的起止點，術(shù)后肌間不形成瘢痕組織，并且保護了多裂肌深面的神經(jīng)支配，避免了多裂肌的失神經(jīng)性退變．不影響患者術(shù)后的腰背部肌肉功能，減少腰背痛；②準確的肌間分離可以保證操作是在無血管的界面進行，能夠顯著減少術(shù)中的出血量。術(shù)畢由于椎旁肌肉可自行靠攏關(guān)閉潛在的腔隙，所以術(shù)后無須再放置引流管，也避免了術(shù)后的再次失血；③由于經(jīng)椎旁肌入路保留了多裂肌的完整性，并且避免了牽拉損傷，可以使患者在術(shù)后早期臥床時能夠自如地作側(cè)身運動，能夠明顯緩解患者術(shù)后的疼痛；術(shù)中經(jīng)肌間隙入路直接暴露人字嵴進針點，避免了損傷關(guān)節(jié)突關(guān)節(jié)囊，減少脊柱退變[9]。經(jīng)多裂肌和最長肌間隙入路適用于單純的胸腰椎壓縮性骨折，僅損傷前中柱的爆裂性骨折，椎管內(nèi)壓迫小于1/3而無神經(jīng)癥狀者，而腰3以下及過度肥胖者使用須謹慎[8]。腰背部肌肉是維持腰椎穩(wěn)定性的重要結(jié)構(gòu)之一，加強腰背部肌肉的鍛煉，有助于維持及增強腰椎的穩(wěn)定性，延緩腰椎勞損退變進程，有效地預(yù)防急慢性腰部損傷和腰痛的發(fā)生。胸腰段骨折患者術(shù)后常因疼痛、未重視腰背肌鍛煉、術(shù)后臥床休息或佩帶腰圍時間過長等因素導致腰背肌廢用性萎縮和無力，甚至引起腰椎不穩(wěn)、骨不連、內(nèi)固定斷裂及頑固性腰背痛等并發(fā)癥。腰背肌鍛煉能促進腰背肌血液循環(huán)，增強局部供氧量，減輕局部組織水腫，同時能促進機體新陳代謝，增強腰背肌肌力，使脊柱獲得相對的穩(wěn)定性和靈活性。本組患者分別采用后正中入路及經(jīng)多裂肌和最長肌間隙入路配合術(shù)后康復鍛煉治療無神經(jīng)癥狀型胸腰椎骨折，治療中發(fā)現(xiàn)多裂肌入路組在手術(shù)時間、出血量、術(shù)后耐受腰背肌鍛煉時間、術(shù)后下地時間、術(shù)后疼痛視覺模擬量表評分、術(shù)后半年腰背痛JOA評分明顯優(yōu)于后正中入路組。多裂肌入路具有創(chuàng)傷小，椎旁肌無失神經(jīng)及血管支配，術(shù)后疼痛輕，恢復快，能早期進行腰背肌功能鍛煉及早期下地等優(yōu)點。術(shù)后腰背肌康復鍛煉能增強腰背肌肌力，防止椎旁肌萎縮，增加胸腰椎穩(wěn)定性，預(yù)防術(shù)后頑固性腰痛，椎體高度丟失，內(nèi)固定斷裂等。術(shù)前、術(shù)后及末次隨訪時Cobb角的變化兩組間無統(tǒng)計學意義，說明多裂肌入路也能很好的進行胸腰椎骨折復位固定。術(shù)后一年腰背痛JOA評分兩組無明顯差異，可能與術(shù)后兩組均進行長時間腰背肌功能鍛煉，腰背肌肌力較強，椎體穩(wěn)定，患者長時間后適應(yīng)了腰背部的變化，及術(shù)后形成疤痕組織有關(guān)。因此，經(jīng)多裂肌和最長肌間隙入路結(jié)合術(shù)后早期康復鍛煉治療無神經(jīng)癥狀型胸腰椎骨折是一種實用的綜合治療方法，值得推廣。4 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作者：吳健，男，1979年生，江蘇省常熟市人，漢族，醫(yī)學博士，主治醫(yī)師，常熟市第二人民醫(yī)院脊柱外科，主要從事脊柱外科方面的研究。郵箱：wu_120@sina.com手機：13646230880地址：江蘇省常熟市海虞北路68號常熟市第二人民醫(yī)院脊柱外科郵編：215500【Author′s address】Department of Orthopaedics, the Second Hospital of Changshu, Changshu ,215500,China骨髓間充質(zhì)干細胞復合可注射型纖維蛋白凝膠TGF-β1移植治療兔椎間盤退變的實驗研究吳健 楊金華 楊宗華 王筱林 張偉 沈斐 （江蘇省常熟市第二人民醫(yī)院骨科 215500 常熟市）A Research on Mesenchymal Stem Cells Compound Injectable Fibrinousgelatin TGF-β1 Transplantation Treatment of Rabbit Intervertebral Disc DegenerationWu Jian,Yang Jinhua,Yang Zonghua,Wang Xiaolin,Zhang Wei,Shen FeiAbstract AIM: To explore the feasibility of rabbit mesenchymal stem cell transplantation’s inhibiting intervertebral disc degeneration. Method: 54 white New Zealand rabbits are randomly divided into three groups: (1) degeneration model group; (2) pure fibrinousgelatin TGF-β1 transplanted group; (3) mesenchymal stem cells TGF-β1 transplanted group. Every group has 18 rabbits. In the degeneration model group, induce and establish the degeneration model merely by means of puncturing the annulus fibrosus with needles of defined gauges and aspirating some nucleus pulposus tissue from the intervertebral discs; in the pure fibrinousgelatin TGF-β1 transplanted group and the mesenchymal stem cells TGF-β1 transplanted group, 2 weeks after inducing degeneration model, transplant fibrinousgelatin TGF-β1 complex and mesenchymal stem cells fibrinousgelatin TGF-β1 complex respectively. Carry out CR, MRI and histologic examinations respectively in the 4th, 8th and 12th weeks (2nd, 6th and 10th weeks after transplant operation). Results: the disc height index (DHI) obviously decreases in the degeneration model group and the pure fibrinousgelatin TGF-β1 transplanted group, which is positively correlated with time; the stem cells transplanted group decrease slowly. MRI results show an increasingly aggravated degeneration in the degeneration model group and the stents transplanted group along with time, while the degeneration in the stem cells transplanted group is not obvious. An immunohistochemistry study and a histological examination indicate a decreasing quantity of the nucleus pulposus cells and the content of type Ⅱ collagen in the degeneration model group, compared with that of the disc as well as an obviously increasing rate of cells apoptosis. The pure fibrinousgelatin TGF-β1 transplanted group is similar to the degeneration model group with an obviously increasing quantity of stem cells apoptosis in the stem cells transplanted group and type Ⅱ collagen content compared with the degeneration group and the pure stents transplanted group while the cells apoptosis rate decreases. Conclusion: Stem cells can prohibit intervertebral disc degeneration. This lays the experimental foundation for further researches. 摘要 目的：探討兔骨髓間充質(zhì)干細胞移植抑制椎間盤退變的可行性，為后續(xù)的臨床研究提供實驗基礎(chǔ)。方法：新西蘭大白兔54只，隨機分為3組：（1）退變模型組，（2）單純纖維蛋白凝膠TGF-β1移植組，（3）骨髓間充質(zhì)干細胞纖維蛋白凝膠TGF-β1移植組，每組18只。退變模型組單純用針刺法誘導建立退變模型，單純纖維蛋白凝膠TGF-β1移植組及骨髓間充質(zhì)干細胞纖維蛋白凝膠TGF-β1移植組退變模型誘導兩周后分別移植入纖維蛋白凝膠TGF-β1復合物及骨髓間充質(zhì)干細胞纖維蛋白凝膠TGF-β1復合物，分別于術(shù)后4、8、12周（移植術(shù)后2、6、10周）行CR、MRI及病理檢查。結(jié)果：椎間盤高度指數(shù)(DHI)在退變模型組及單純支架移植組中下降明顯，與時間呈正相關(guān)；干細胞移植組下降較緩慢。MRI結(jié)果顯示退變模型組及支架移植組隨時間的推移，退變逐漸加重，干細胞移植組退變不明顯。免疫組化及組織學檢查顯示退變模型組髓核細胞的數(shù)量及Ⅱ型膠原含量較對照間盤進行性減少，細胞凋亡率明顯增加，單純支架移植組與退變模型組相似，干細胞移植組髓核細胞的數(shù)量及Ⅱ型膠原含量較退變組及單純支架移植組明顯增多，細胞凋亡率下降。結(jié)論：干細胞移植能明顯抑制椎間盤退變，為進一步的研究奠定了實驗基礎(chǔ)。 關(guān)鍵詞:骨髓間充質(zhì)干細胞；纖維蛋白凝膠；轉(zhuǎn)化生長因子β1；椎間盤退變；兔0 引言腰腿痛是影響人類健康的常見病與多發(fā)病，病因很復雜，其中椎間盤退變被認為是主要病因[1-9]。椎間盤退變的病理生理學機制至今尚未明了。椎間盤退行性病變理想的治療方法是通過人工干預(yù)，早期阻止或逆轉(zhuǎn)椎間盤退行性病變，恢復其生物學功能。骨髓間充質(zhì)干細胞是一群存在于骨髓中的非造血干細胞，具有來源充足，體外分離培養(yǎng)操作簡單，細胞數(shù)通過培養(yǎng)可獲得大量擴增，免疫原性低，移植引起的排斥反應(yīng)相對較輕等優(yōu)點[10-13]，是一種理想的種子細胞。骨髓間充質(zhì)干細胞移植為治療椎間盤退變提供了一種新的思路。1 材料和方法設(shè)計：觀察對比實驗。單位：常熟市第二人民醫(yī)院。材料：新西蘭大白兔54只（由蘇州大學動物實驗中心提供， 許可證號：SYXK蘇2002－0037）， 雌雄不限，體重2.5±0.3ｋｇ，年齡1歲。 隨機分為3組：（1）退變模型組，（2）單純纖維蛋白凝膠TGF-β1移植組，（3）骨髓間充質(zhì)干細胞纖維蛋白凝膠TGF-β1移植組，每組18只。設(shè)計、實施、評估者：實驗設(shè)計為第一作者；資料收集為第一作者；實施為第一、二、三、四、五、六作者；評估為第一作者，采用盲法評估。方法：手術(shù)方法：全骨髓法［14-16］培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細胞備用，取54只兔子用針刺抽吸法［17-21］建立椎間盤退變的動物模型，椎間盤退變動物模型建立后2周隨機取36只兔子，18只為單純纖維蛋白凝膠TGF-β1移植組，18只為骨髓間充質(zhì)干細胞纖維蛋白凝膠TGF-β1移植組。用10％水合氯醛3ml／kg耳緣靜脈注射麻醉，采用腹正中切口，暴露脊柱的正前方。仔細辨認L3／4、Ｌ4／5 及 Ｌ5／6椎間盤，單純纖維蛋白凝膠TGF-β1移植組每椎間盤注入纖維蛋白凝膠TGF-β1復合物0.04ml。干細胞移植組注入骨髓間充質(zhì)干細胞纖維蛋白凝膠TGF-β1復合物0.04ml，即共植入2×106個細胞。術(shù)后將動物隨機分為2、6、10 周3個單純纖維蛋白凝膠TGF-β1移植組及3個骨髓間充質(zhì)干細胞移植組，每組6只，分籠常規(guī)飼養(yǎng)。影像學檢查：CR檢查：分別于術(shù)前及術(shù)后4、8、12周（移植術(shù)后2、6、10周）對每組兔應(yīng)用計算機X線攝片機進行側(cè)位攝片。在計算機圖象處理軟件上測出椎間盤前后緣高度及上位椎體前后緣高度，計算出椎間盤高度指數(shù)（DHI），再進行術(shù)后DHI/術(shù)前DHI，求出椎間盤高度指數(shù)百分比來評估椎間盤高度變化。 MRI檢查：應(yīng)用E-SCAN關(guān)節(jié)專用磁共振掃描儀對兔腰椎行矢狀位 T2加權(quán)像（T2W1）掃描。所有MRI影像資料由兩位資深 MRI醫(yī)師盲法閱片并提出診斷意見，將Thompson分級法[22]改良后作為評估標準，共分為4級：1、正常；2、信號輕度減弱伴有高信號區(qū)范圍的縮??；3、信號中度減弱；4、信號重度減弱。組織學觀察：分別在術(shù)后4、8、12周（移植術(shù)后2、6、10周）將兔處死， 取L4/5，L5/612個椎間盤髓核組織進行HE染色、Ⅱ型膠原及Tunel免疫組織化學染色，取6周的L3／4椎間盤行掃描電鏡觀察。統(tǒng)計學處理：實驗數(shù)據(jù)應(yīng)用SAS 6.12統(tǒng)計學軟件處理。實驗結(jié)果以x±s表示，MRI資料采用雙向有序行X列表卡方檢驗，DHI%、細胞凋亡率采用方差分析，用SNK法行組間比較。2 結(jié)果2.1 實驗動物數(shù)量分析 參加實驗數(shù)量54只，進入結(jié)果分析數(shù)量54只，中途無死亡、脫落。2.2 CR影像變化特征 所有兔均存活，術(shù)后4周椎間隙開始變窄，隨時間增加，椎間隙高度呈逐漸下降趨勢。各組間對比4周時 P0.05，干細胞移植組與其余兩組間有統(tǒng)計學意義，P