首都兒科研究所附屬兒童醫(yī)院

公立三甲兒童醫(yī)院

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疾?。? 風濕病
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抗核抗體譜檢測的臨床意義解讀抗核抗體（ANA），是包含多種不同臨床意義的一系列自身抗體，靶向的抗原包括：DNA、可提取核抗原（ENA）、RNA、核糖核蛋白（RNP）。一、主要分為以下：抗DNA抗體（如抗ss-DNA抗體、抗ds-DNA抗體）?？菇M蛋白抗體(AHA)：抗H1、抗H2A、抗H2B、H3、抗H4抗體等（藥物性狼瘡的陽性率達95%以上，常見的藥物有肼苯達嗪、異煙肼及氯丙嗪）。抗非組蛋白抗體：ENA抗體譜（抗Sm抗體、抗RNP抗體、抗SSA/Ro抗體、抗SSB/La抗體、抗Mi-2抗體、抗Ku抗體、抗Scl-70抗體、抗Jo-1抗體）。抗核仁抗體：抗PM-Scl抗體、抗Th/To抗體、抗U3-RNP、抗4-6-S-RNA抗體等?？蛊渌毎煞挚贵w（PCNA）。二、何時檢測ANA：高驗前概率的患者：存在SLE(如光敏性、胸膜炎)、SSc(雷諾現(xiàn)象、皮膚改變)或干燥綜合征(Sj?gren‘sdisease,SjD，難以解釋的眼干口干)的臨床證據(jù)時，根據(jù)ANA結果很容易診斷。如果患者的癥狀、體格檢查和實驗室結果提示有較大或很大概率為以下一種或多種診斷，適合檢測ANA：⑴關節(jié)出現(xiàn)持續(xù)性炎癥，伴有骨骼及關節(jié)疼痛、腫脹、僵硬、活動受限。早晨起床時關節(jié)感覺僵硬，在活動后減輕，稱為“晨僵”。⑵肌肉疼痛、紅腫、無力，甚至萎縮，做精細動作困難。⑶皮膚出現(xiàn)明顯紅斑、皮疹，光照后情況加重。皮膚出現(xiàn)硬化，觸覺異常，對溫度的感覺出現(xiàn)異常，黏膜處可能出現(xiàn)反復發(fā)作的潰瘍。⑷全身多器官損傷，出現(xiàn)乏力、發(fā)熱、虛弱、貧血、血細胞減少、蛋白尿等癥狀。如果不加選擇地檢測ANA，大多數(shù)陽性結果可能反映假陽性，還可能干擾醫(yī)生的正確診斷。三、假陽性情況：肺疾?。喝缣匕l(fā)性肺纖維化、特發(fā)性肺動脈高壓；慢性感染：如寄生蟲、結核桿菌感染等；肝?。喝缁顒有愿窝?、酒精性肝病等；血液系統(tǒng)疾?。喝绨籽?、骨髓瘤等；其他系統(tǒng)疾?。喝缙鞴僖浦埠?、終末期腎病、I型糖尿病等。健康人群中ANA的陽性率為3%-19%。通常年齡越大，陽性率越高，以低滴度（1:100、1:320）為主。同時，在同一年齡區(qū)間的健康人群中，女性的陽性率也高于男性。四、檢測方法：HEp-2細胞做底物的IIF法檢測ANA使用最廣泛，仍是首選參考方法。五、診斷思路第一步：首先關注抗體滴度常見的抗核抗體滴度包括1:100、1:320、1:1000、1:3200。一般認為抗核抗體1:320以上才有臨床意義，若抗核抗體1:100卻同時伴有特異性抗體陽性時也可認為有臨床意義。第二步：關注核型建議所有“達標級”實驗室“必須”報告11種染色模型(6種核熒光模型，5種細胞漿熒光模型)?！皩I(yè)級”實驗室“應”額外報告18種ANA染色模型。但當前常報告以下核型。1.均質型（H）：靜息細胞的細胞核和分裂細胞的染色體區(qū)域呈彌漫性熒光染色主要和抗組蛋白、抗雙鏈DNA、抗單鏈DNA、抗核小體有關，常見于SLE、藥物性狼瘡、SjD、SSc和RA。均質型也可見于器官特異性自身免疫性疾病，包括橋本甲狀腺炎、PBC和自身免疫性肝炎。對于抗核抗體熒光類型和復發(fā)性流產(chǎn)的關系中，研究認為均質型和復發(fā)性流產(chǎn)關聯(lián)更高。2.核膜型（M）主要和抗雙鏈有關，部分和抗核包膜蛋白有關，常見于狼瘡和自免肝患者體內。一種模型的特征是核膜光滑、連續(xù)、線性染色；另一種是核膜不連續(xù)線性染色。核膜光滑、連續(xù)、線性染色：抗核纖層蛋白和抗核纖層蛋白相關蛋白的抗體。臨床意義尚不確定。SLE、SjD、抗磷脂綜合征和自身免疫性肝病患者中均有此模型報道。不連續(xù)、核孔復合體模型：糖蛋白210(glycoprotein210,Gp210)抗Gp210抗體對PBC具有特異性。3.斑點型（S）細顆粒斑點型：細胞核遍布成百上千的斑點，核仁也可能有熒光染色；分裂細胞的染色體區(qū)無其他熒光染色。靶抗原：Ro60：亞急性皮膚SLE、SjD、SLE、PBC、PM和RA。幾乎所有生育過NLS患兒的母親。La：對SjD具有相對特異性，但也見于SLE患者和生育過NLS患兒的母親。拓撲異構酶Ⅰ(Scl70)：彌漫性SSc，與間質性肺纖維化相關，而其他自身免疫性疾病患者和健康人群中幾乎不會檢出抗Scl70抗體。Ku：可能見于SSc、SLE和PM，SSc中抗ku抗體與肌炎和關節(jié)炎相關。Mi-2：抗體可見于DM，抗體陽性患者通常存在DM的皮膚特征，包括向陽疹和Gottron丘疹，但不會出現(xiàn)肺部病變，且皮質類固醇激素治療效果良好。轉錄中介因子1γ：其抗體可能存在于15%-25%的DM患者，與惡性腫瘤有關黑色素瘤分化相關蛋白5：抗MDA5抗體可見于DM，與無肌病性DM和快速進展的間質性肺疾病有關粗顆粒斑點型：粗顆粒斑點型指細胞核存在成百上千大小不一的斑點，但通常比細顆粒斑點型大。核仁和分裂期染色體無熒光染色。這種熒光模型見于SLE和MCTD。Sm–其抗體對SLE的診斷具有相對特異性，但可能見于MCTD中。U1RNP–其抗體存在于所有MCTD患者，是診斷MCTD的關鍵指標。抗U1RNP抗體也可見于SLE、SjD、SSc、PM和RA。致密細顆粒斑點型：斑點分布于分裂間期細胞除核仁之外的整個細胞核。斑點與分裂細胞的染色體有關。致密細顆粒斑點型在ANA陽性的健康人中常見，在SLE患者中少見。4.核仁型（N）核仁均質或斑點狀熒光染色。靶抗原：PM/Scl復合體(PM-Scl-75、PM-Scl-100)，為外泌體，是一種降解RNA的多蛋白結構。SSc患者存在上述一種或兩種外泌體成分的抗體，皮膚病局限、肺部和腎臟疾病風險降低，但炎癥性肌病風險增加。U3-RNP：核仁纖維蛋白，參與了前核糖體RNA加工的第一步。與彌漫性皮膚病、動脈性肺動脈高壓、肺纖維化和肌炎有關。Th/To復合體(7-2RNP)–可作為核糖核酸酶，從前體tRNA分子中去除5‘前導序列。2%-5%的SSc患者存在抗Th/To復合體成分的抗體，皮膚病局限，但肺纖維化和腎危象風險增加RNA聚合酶ⅠⅡ和Ⅲ–約20%的SSc患者中可檢出抗RNA聚合酶抗體，疾病特異性高。而且與彌漫性皮膚受累和發(fā)生腎危象的風險增加有關?？贵w陽性患者肺纖維化不常見。拓撲異構酶Ⅰ(Scl70)–其抗體可產(chǎn)生核斑點型及核仁型熒光染色模型。5.著絲點型（ACA）著絲粒熒光染色模型的特征是靜息細胞的細胞核散布30-60個大斑點，與有絲分裂細胞赤道板上的染色體排列一致。靶抗原–抗著絲粒蛋白A、B和C的抗體產(chǎn)生這種熒光染色模型?？怪z?？贵w與局限性SSc、PBC、SjD、SLE和單純雷諾現(xiàn)象相關。約30%的局限性SSc患者有此抗體，并與鈣質沉著和肺動脈高壓有關。約15%的PBC患者有抗著絲?？贵w。6.PML-Sp100核小體：靜息細胞的細胞核中散布5-20個大斑點。與著絲粒模型不同的是，此型每個細胞中斑點數(shù)量更少，并且分裂細胞的染色體不染色。PML-Sp100核小體是一種多蛋白細胞結構，參與多種細胞功能，包括基因轉錄、細胞凋亡、細胞周期控制和DNA修復。這種模型與抗線粒體抗體(antimitochondrialantibody,AMA)陽性或陰性的PBC有關。20%的AMA陽性PBC患者中存在抗PML-Sp100核小體成分的抗體。7.增殖細胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)熒光染色模型，這類抗體在細胞體積逐漸增大的G1期產(chǎn)生核斑點熒光染色，在DNA復制的S期產(chǎn)生密集均勻的核染色。分裂細胞不染色。意義尚不確定。這類抗體最初只在少數(shù)SLE患者中發(fā)現(xiàn)，后來也在其他自身免疫性疾病、病毒性肝炎和惡性腫瘤患者中發(fā)現(xiàn)。8.著絲粒蛋白-F：靜息細胞的細胞核出現(xiàn)細顆粒染色，核仁無染色。處于DNA合成和有絲分裂“間隙”即細胞分裂G2期的細胞熒光染色最強。靶抗原–抗CENP-F抗體產(chǎn)生這種熒光染色模型。產(chǎn)生CENP-F熒光染色模型的自身抗體陽性患者中，約一半存在惡性腫瘤。相關惡性腫瘤包括乳腺癌、肺癌、前列腺癌以及淋巴瘤9.抗線粒體抗體AMA熒光染色模型的特征是整個細胞漿內遍布顆粒狀和絲狀熒光染色。靶抗原線粒體蛋白的線粒體幾種產(chǎn)生這種熒光染色模型的抗體對PBC具有高度特異性。10.細胞漿細顆粒：Jo-1(組氨酸t(yī)RNA合成酶)和其他tRNA合成酶：抗tRNA合成酶抗體是DM或PM一種亞型的標志物，該亞型表現(xiàn)為間質性肺病、肌炎、非侵蝕性關節(jié)炎、雷諾現(xiàn)象和“技工手”。抗Jo-1(組氨?；蚪M氨酸t(yī)RNA合成酶)抗體是最常見的抗tRNA合成酶自身抗體，可見于20%-30%的PM患者和60%-70%的PM伴間質性肺病患者。核糖體P蛋白：可見于10%-20%的SLE患者，其他自身免疫性疾病中幾乎未見。Ro52：其抗體可見于SLE、SjD、SSc和PM患者信號識別顆粒：其抗體可見于約10%的炎癥性肌病患者，可識別出快速進展的壞死性肌病患者亞群。11.細胞骨架熒光染色：細胞漿中的纖維網(wǎng)絡染色。靶抗原–肌動蛋白、肌動蛋白相關蛋白、細胞角蛋白、原肌球蛋白和波形蛋白的抗體可見于Ⅰ型自身免疫性肝炎或病毒性肝炎。12.高爾基體細胞核周圍的細胞漿不規(guī)則染色，靶抗原：巨高爾基蛋白giantin、高爾基體蛋白245、高爾基體蛋白110抗高爾基體抗體最初在SjD患者中發(fā)現(xiàn)，后來在SLE、RA、結節(jié)病、特發(fā)性小腦共濟失調和病毒感染患者中也檢測到。第三步：關注陽性抗體何時需進一步檢測自身抗體—是否需進一步抗體檢測取決于原先所用的抗體檢測方法。如果IIF檢測ANA陽性，報告的熒光染色模型可提供自身抗體線索。根據(jù)患者臨床表現(xiàn)，需要進一步對特定自身抗體行固相檢測。對于ANA檢測陽性并可能會懷孕者，要求行抗Ro/SSA和抗La/SSB抗體檢測。存在這些自身抗體表明妊娠期發(fā)生NLS的風險增加。ANA陰性但臨床高度懷疑SLE，可能需要用固相法檢測抗Ro60、抗Ro52和抗核糖體P蛋白的抗體，因為HEp-2細胞底物可能缺乏這些抗原。如果ANA初始檢測采用固相法，陽性結果可確定特定自身抗體，無需進一步檢測。例如，存在抗著絲粒蛋白或抗Scl70抗體則支持SSc的診斷。同樣，存在抗Sm抗體則支持SLE的診斷。固相檢測法中包含的自身抗原數(shù)量比HEp-2細胞底物中少。因此，如果固相法檢測ANA陰性，并且高度懷疑系統(tǒng)性自身免疫性疾病，則需要用HEp-2細胞做底物的IIF法檢測ANA。固相法檢測ANA不如IIF敏感，可能產(chǎn)生假陰性結果。對于ANA檢測陰性患者，如果沒有風濕性疾病的新發(fā)癥狀體征，通常不需要復查ANA。兒童ANA相關自身免疫性疾病的患病率比成人低，而感染發(fā)生率較高，感染偶爾與自身免疫性疾病的癥狀相似，有可能導致假陽性ANA檢測結果。